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1. 從液氮或-80℃冰箱中取出凍存細胞，馬上放入37℃水浴鍋中，并不時地攪拌，使細胞在2min內(nèi)快速解凍。

2. 待其融化之后，用75%酒精擦拭冷凍管外部，在超凈臺中打開凍存管蓋子，吸取細胞懸液加入至含有完全培養(yǎng)基的離心管中，低速離心5min后棄去上清液，再加入適量完全培養(yǎng)基輕輕吹打，使細胞重懸。

3. 將重懸后的細胞緩慢加入到含有培養(yǎng)液的培養(yǎng)瓶，十字輕晃細胞培養(yǎng)瓶令細胞分布均勻，然后放入恒溫培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

1. 整個過程應(yīng)在超凈臺中進行，注意嚴(yán)格使用無菌操作技術(shù)。

2. 解凍過程務(wù)必快速，如果復(fù)溫速度太慢，會造成細胞損傷。

3. 凍存管放入水浴中注意用鑷子夾住細胞凍存管并在水浴中不時晃動，使其受熱均勻，并防止水浴時水進入細胞凍存管內(nèi)造成污染。

4.打開細胞凍存管之前要用酒精棉球?qū)龃婀芟静⒘栏伞?/p>

5.液氮操作有一定的危險性，打開液氮罐取出細胞凍存管時，戴上防護眼鏡。