細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液——PBS\\/DPBS
磷酸鹽緩沖液是一種平衡鹽溶液,主要用途是一些化學(xué)實(shí)驗(yàn)中不影響實(shí)驗(yàn)反應(yīng)的情況下調(diào)節(jié)pH值,以便讓實(shí)驗(yàn)的化學(xué)反應(yīng)在最佳條件下進(jìn)行。部分用于食品或是飼料行業(yè)加工,如食品或者飼料真菌毒素檢驗(yàn)中Elisa方法的洗板應(yīng)用或者食品微生物檢驗(yàn)中的稀釋緩沖液。
在清洗細(xì)胞時(shí),有時(shí)會(huì)使用生理鹽水,但其并不具備緩沖能力,而磷酸鹽緩沖液除了 NaCl 外,還有KCl、Na2HPO4 和 KH2PO4 成分,可以在溫度、氣體組成變化時(shí)緩沖,且pH 值范圍很廣,以此保證正常的pH和滲透壓,對(duì)細(xì)胞膜和離子通道有更好的保護(hù)作用,因此,生理鹽水并不能代替磷酸鹽緩沖液使用。
PBS
PBS(Phosphate-Buffered Saline,即磷酸鹽緩沖液),能夠提供相對(duì)穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH 緩沖能力,pH7.2-7.4,與人體 pH 相近,溶液滲透壓與人體血液等滲,一般作為溶劑,起溶解保護(hù)試劑的作用。是生物學(xué)中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液,用于分子克隆、細(xì)胞培養(yǎng)及其檢測(cè)等實(shí)驗(yàn)。
DPBS
DPBS(Dulbecco's Phosphate-Buffered Saline,即杜氏磷酸鹽緩沖液),也是一種磷酸鹽緩沖液,與常規(guī)PBS的不同之處在于磷酸鹽的含量稍低些,并含有鈣鎂離子,多用于處理較脆弱的細(xì)胞,DPBS主要用于胚胎學(xué)方面的研究,多用于胚胎的沖洗液、凍存液和培養(yǎng)液。pH7.2-7.4,與人體 pH 相近,溶液滲透壓與人體血液等滲,不含Ca2+、Mg2+。適用于各種細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,例如解離前清洗細(xì)胞、運(yùn)輸細(xì)胞或組織、稀釋細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)和制備試劑。
DPBS 是細(xì)胞清洗、標(biāo)本稀釋的首選。與常規(guī)的PBS相比,DPBS 中不含 Ca2+和 Mg2+。Ca2+、Mg2+作為細(xì)胞膜的重要組成成分,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含 Ca2+、Mg2+的 DPBS 可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán),維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持 pH 穩(wěn)定,供細(xì)胞和組織一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的離子環(huán)境;在細(xì)胞消化過(guò)程,如使用 PBS 進(jìn)行清洗細(xì)胞,Ca2+的殘留也會(huì)影響胰酶活性,致使細(xì)胞難以消化。
注意
1.上述DPBS Buffer中無(wú)二價(jià)陽(yáng)離子,如需要,可在配方中補(bǔ)充1mm CaCl2和0.5mm MgCl2。
2.可以加入葡萄糖、丙酮酸鈉等,以更利于培養(yǎng)物的生長(zhǎng)。
3.DPBS磷酸鹽緩沖液已用于稀釋新鮮紅細(xì)胞用于研究紅細(xì)胞聚集物的捕獲.它還用于洗滌微孔板中的孔.
4.DPBS是一種用于處理和培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的平衡鹽溶液。
5.鈣和鎂離子的作用及有助于細(xì)胞的結(jié)合和成團(tuán)。
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